《超级马力欧兄弟：失落的关卡》是《超级马力欧兄弟》的直接续作。它不应与西方版的《超级马力欧兄弟 2》混淆，而是对原作的一个扩展，包含大量复用的图形和概念，同时也有新的元素加入。这款游戏最初仅在日本的 Family Computer Disk System 上发布。

有一天，蘑菇人们居住的和平国度遭到了拥有强大魔法的大乌龟军团鲍泽族的入侵。这种魔法将无害的蘑菇人变成了岩石、砖块和植物，导致蘑菇王国陷入荒废。唯一能破解这个魔法并复活蘑菇人的就是蘑菇王国的公主桃花公主，但如今她已经被大巫师王鲍泽囚禁了。但是马里奥站了出来，准备击败乌龟军团的成员，救出公主桃子，并再次为蘑菇王国带来和平。